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PacBio三代测序平台的长读长及无需PCR扩增的技术优势，可进一步降低引入人为错误的可能性，克服部分微生物基因组GC含量高或重复序列多等问题，实现对微生物基因组进行更加详细的描绘因。

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密码子优化，指的是利用偏爱密码子（Preferred codons)，即避免利用率低的或稀有密码子，简化基因转录后的mRNA的二级结构，去除不利于高效表达的模体（Motif），加入有利于高效表达的模体，调整GC含量等这些方法重新设计基因。基因合成的商业化大大推动了密码子优化的适

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1. 总RNA提取与质检2. 已知序列的验证3. 合成5'和3' RACE-ready cDNA第一链；通过LD-PCR分别进行5' 和3' RACE4. 基因未知序列验证

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