Coelenterazine hcp 腔肠素hcp
产品名称: Coelenterazine hcp 腔肠素hcp
英文名称: Coelenterazine hcp 腔肠素hcp
产品编号: 40910ES72
产品价格: 0
产品产地: Yeasen
品牌商标: Yeasen
更新时间: 2024-12-10T13:16:28
使用范围: null
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产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 储存 | 价格(元) |
Coelenterazine hcp 腔肠素hcp | 40910ES72 | 1×250μg | -20℃避光保存 | 2359.00 |
背景描述
腔肠素(Coelenterazine)是自然界中资源最丰富的天然荧光素,是绝大多数海洋发光生物(超过75%)的光能贮存分子。腔肠素可作为许多荧光素酶的底物,比如海肾荧光素酶(Rluc),Gaussia分泌型荧光素酶(Gluc),以及包括水母发光蛋白(aequorin)和薮枝螅发光蛋白(Obelia)在内的光蛋白(Photoproteins)。其发光原理是:以腔肠素为底物的荧光素酶在有分子氧的条件下,氧化腔肠素,产生高能量的中间产物,并在此过程中发射蓝色光,峰值发射波长约为450~480nm。
腔肠素作为水母发光蛋白复合物(Aequorin)的组成成分,只有与钙离子(Ca2+)结合后,才能被氧化生成高能量产物Coelenteramide,同时释放出CO2和蓝色荧光(~466nm)。其具有以下几个优点:1)能检测较大范围的Ca2+浓度(0.1-100μM);2)样品无自体荧光,背景荧光较低,尽管信号较荧光钙离子指示剂弱,但信噪比更高,因此具有较高灵敏度;3)Aequorin能够稳定维持在细胞内,能够进行数小时至数天Ca2+的监测。
图1. 腔肠素作为水母发光蛋白辅助因子的Ca2+依赖反应流程
腔肠素具有能量转移(Bioluminescence Resonance Energy Transfer,BRET)的特性:在底物腔肠素存在的情况下,荧光素酶(如Rluc)催化底物发生蓝光,能量转移到EYFP(增强的黄色荧光蛋白),发出绿光(~530nm)。通过Rluc融合蛋白和EYFP融合蛋白两者间的相互关系研究蛋白-蛋白之间的相互作用。BRET的信号可通过比较绿光和蓝光的量来进行测定,消减了因细胞数、细胞类型和其他实验变量而引起的数据变量。
主要应用
1. 活体成像。
2. 报告基因检测。
3. 检测细胞/组织内活性氧(ROS)水平:细胞和组织内的超氧阴离子和过氧化亚**阴离子能够增强腔肠素在酶非依赖性的氧化体系中自发荧光。
4. 高通量筛选。
5. 监测活细胞内钙离子水平。
产品描述
腔肠素hcp(Coelenterazine hcp)系天然腔肠素衍生物。腔肠素hcp-水母发光蛋白复合物的荧光强度比天然腔肠素复合物高190倍,其量子产量高,与Ca2+反应速度快,非常适合用于钙离子水平的检测。
产品性质
英文别名(English synonym) | CLZN-hcp |
CAS号(CAS NO.) | 123437-32-1 |
分子式(Formula) | C25H25N3O2 |
分子量(Molecular weight) | 399.48g/mol |
溶解性(Solubility) | 可溶于甲醇和乙醇,不溶于DMSO |
外观(Apperance) | 黄色至橘色粉末 |
纯度(Purity)(TLC) | ≥95% |
结构(Structure) |
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运输和保存方法
冰袋运输。粉末-20℃避光干燥保存,最好保存在惰性气体环境下,避免接触空气。
腔肠素hcp工作液的配制
腔肠素hcp溶解特性:不溶于水。目前毒性最低的溶剂是100%乙醇,可配制浓度为0.1-1mg/ml。加入pH低于7.0的酸性缓冲液(碱性pH会快速降解底物)稀释成低浓度工作液。切忌溶于DMSO。
腔肠素hcp保存特性:建议溶液现配现用!体外实验,需将稀释后的工作液室温放置20-30min,方可稳定工作。该工作液可室温稳定放置3-4h,有非常微弱的信号衰减发生。不建议储存液-20℃或更低温度保存,因为其高能量的二氧环丁酮结构即使在低温的情况下也会发生降解,导致荧光强度明显变弱。短时间保存条件:-70℃避光保存于塑料管内(溶液中不含有Ca2+),且有惰性气体保护。
注意事项
1. 粉末最好使用惰性气体(氮气或氩气),在密封良好的塑料管中避光保存于-20℃,长期保存于-70℃。管内即使存在少量空气,可能造成腔肠素n氧化失活,造成在不同试验间的量化分析结果无法比较。
2. 本品接触空气,水或者任何氧化试剂会不稳定。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
附录1. 腔肠素及其衍生物的特性
货号 | 基本描述 | Em (nm) | RLC* | Relative Intensity | Half-rise time (ms)** | |
40904 | 天然腔肠素 Coelenterazine native | 水母发光蛋白的辅助因子,高灵敏度化学发光法检测Ca2+浓度(0.1~100μM)。常用作Rluc和Gluc等荧光素酶的报告基因检测底物。BRET分析,以及细胞/组织样本中的超氧阴离子和过氧化亚**阴离子的化学发光检测。快速再生能力比较重要的实验推荐使用本底物。 | 466 | 1.00 | 1 | 6-30 |
40906 | 腔肠素h Coelenterazine h | 一种水母发光蛋白复合物,其发光强度比天然腔肠素高10倍以上。适用于报告基因分析。 | 466 | 0.75 | 16 | 6-30 |
40910 | 腔肠素hcp Coelenterazine hcp | 腔肠素hcp-水母发光蛋白复合物的荧光强度比天然腔肠素复合物高190倍,且量子产量高和Ca2+反应速度快。 | 445 | 0.65 | 500 | 2-5 |
40909 | 腔肠素cp Coelenterazine cp | Coelenterazine cp 光蛋白复合物的发光强度是天然腔肠素的15倍,且具有更快的Ca2+反应性。 | TUNEology 波长可调检测卡盒-->
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