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新品上市 │ 等温扩增新宠——RPA技术核心酶原料重磅上市！

作者：翌圣生物科技（上海）股份有限公司 2023-03-15T15:24 (访问量:2889)

新品上市 │ 等温扩增新宠——RPA技术核心酶原料重磅上市！

重组酶聚合酶扩增（Recombinase Polymerase Amplification，RPA）是Piepenburg等人在2006年利用参与细胞DNA合成的蛋白重组和修复开发出的一种新的核酸恒温扩增技术。该技术可以在37~42 ℃条件下实现待测靶标的快速检测。它具有反应灵敏度高、特异性强、对仪器依赖程度低且可整合多种检测模式等优点，特别适用于基层和现场即时检测，可广泛应用于体外诊断、兽医、食品安全、生物安全、农业等领域[1]。

RPA技术原理

RPA技术主要依赖于能结合寡核苷酸引物的T4噬菌体来源的重组酶T4 UvsX、单链结合蛋白gp32和链置换Bsu DNA 聚合酶以及两条特异性的上下游引物实现扩增，具体扩增原理如图1所示：

  1. 重组酶引物复合体的形成：重组酶T4 UvsX在ATP的参与和定位因子（T4 UvsY）的帮助下与扩增引物结合形成重组酶引物复合体，并在双链DNA中寻找同源序列；

  2. 重组酶引物复合体定位至同源序列：重组酶引物复合体一旦定位到同源序列，则会插入双链DNA形成D-环结构，启动链置换反应，单链结合蛋白gp32会与解开的DNA链结合防止进一步被置换。

  3. 链置换扩增启动：重组酶T4 UvsX从重组酶引物复合体中被水解，3'端引物暴露并与Bsu DNA聚合酶结合，DNA开始复制延伸，最终两条母链分离，形成两条新的互补双链DNA。该反应在37-42℃下进行，可在30 min内实现目标序列1012倍的扩增。

图1.重组酶聚合酶扩增RPA技术扩增原理图[2]

RPA技术优势

  • 快速检测：10~30 min内（通常）将核酸样本扩增至可检测的水平。

  • 检测灵敏度高：可将痕量的核酸模板（低至单拷贝）扩增至可以检出的水平，且通常无需进行核酸纯化。

  • 无需昂贵的配套仪器设备：37~42°C恒温反应，无须热循环，摆脱仪器束缚，方便快捷。

RPA技术应用

RPA技术可用于不同种类的目标生物检测，如细菌、真菌、病毒、原生动物等的双链DNA、单链DNA、甲基化DNA以及通过RNA或miRNA反转录产生的cDNA等核酸样本。RPA目前有很多的应用，覆盖了农业、医学、食品、疫病防控等领域。

翌圣重组酶聚合酶扩增RPA技术核心酶原料

针对RPA技术，翌圣可提供自主研发的高品质核心酶原料，具备纯度高、残留控制严格、单次产能高可确保批间稳定性的产品优势，主要包括链置换Bsu DNA polymerase、T4 UvsX Recombinase、T4 UvsY protein、T4 gene 32 protein及肌酸激酶Creatine Kinase。

01

产品与选择

货号

主要功能

产品名称

11078ES

具有链置换活性的DNA恒温扩增聚合酶

Bsu DNA polymerase

(Large fragment, 5 U/μL)

11079ES

具有配对和链转移活性的重组酶

T4 UvsX Recombinase(2 μg/μL)

11080ES
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