Carrier RNA常见类型、作用原理及优缺点介绍

1. Carrier RNA概念及作用

荧光定量PCR是分子诊断主流技术，包括核酸提取和PCR扩增两个环节，两者共同决定了该检测方法的评测参数。以最直观最关键的检测灵敏度指标来看，只有实现了提取环节最优化和PCR扩增环节最优化的情况下，检测灵敏度的结果才更可信。检测灵敏度显示了检测试剂的检测下限，对于荧光定量PCR而言，即一定样本浓度下的病毒核酸检出率。

Carrier RNA，中文名载体RNA，又叫核酸助沉剂。在核酸提取环节，提取使用到的离心管壁多是聚丙烯的材料，管壁上有静电，会吸附核酸。在提取纯化过程中采用Carrier RNA 可帮助核酸去除静电效应，保证核酸能很好被吸附到纯化柱上，提高洗脱效率，从而达到尽可能多的回收样本中核酸！

2. Carrier RNA常见类型

作为核酸沉淀的辅助物质，Carrier RNA有多种类型。

3. 优质产品介绍——上海翊圣生物生产的Carrier RNA

翊圣生物Carrier RNA是酵母来源的RNA，无DNase、RNase酶残留，蛋白和DNA残留含量极低。可用于病毒核酸提取、微量DNA提取等实验，提取的核酸可用于后续RT-PCR，RT-qPCR等实验。产品分为液体和冻干型粉末制剂，便于直接使用和长距离运输、保存。

本品为核酸混合物，产品使用非常简单，在纯化核酸过程中通过添加微克量（μg）的Carrier RNA，即可实现提升低至皮克级别（pg）微量核酸的沉淀效率，达到提升试剂检测灵敏度的目的。

其作用原理主要是通过混入大量核酸（Carrier RNA），减少了目标核酸物质的管壁吸附损失，进而提高微量的核酸纯化柱上的结合和洗脱效率，同时降低了提取环境中的RNase降解微量RNA的概率。

4. 应用案例

Carrier RNA的加入有助于低丰度SARS-CoV-2假病毒核酸检测

使用磁珠法拭子样本病毒DNA/RNA提取试剂盒（产品货号：19387ES），提取不同浓度的SARS-CoV-2假病毒样本核酸，后续使用新冠检测试剂盒进行检测N基因。结果显示，添加Carrier RNA后，具有更高的提取效率，使下游检测更灵敏。

见图1-1

Carrier RNA放置于65℃不同时间（3d,6d,9d）后，与提取性能标准保存条件一致

将Carrier RNA粉末分别放置于65℃ 3d，6d，9d进行加速试验测试，测试方案为：使用磁珠法拭子样本病毒DNA/RNA提取试剂盒（产品货号：19387ES），提取不同浓度的SARS-CoV-2假病毒样本核酸，后续使用新冠检测试剂盒进行检测orf1ab和N基因。结果显示，与标准保存条件（-20℃）相比，置于65℃保存9天的Carrier RNA，性能不发生变化。定量仪器：Biorad CFX96，核酸提取仪：上海儒克生物 Purifier 32 核酸纯化仪。

VIC：